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DP101A-02 -03 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(A款)

DP101A-02 -03 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(A款)

  • 所属分类:基础科研试剂
  • 浏览次数:
  • 发布时间:2021-11-11 07:55:53
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产品参数

产品介绍

琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

(离心柱型)

货号:DP101A               规格:100T/200T                 保存:室温

产品说明:

本试剂盒采用可以高效、专一结合的DNA硅基质材料和独特的缓冲液系统,从TAETBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其他有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等试验。

产品组成:


试剂盒组成

DP101-02(100T)

DP101-03(200T)

保存温度

溶胶液

100ml

200m

RT

漂洗液

15ml×2

30ml×2

洗脱液

30ml

60ml

吸附柱

100个

200个

收集管

100个

200个


储存条件:

该试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴10min,以溶解沉淀。

操作步骤:

1. 琼脂糖凝胶电泳后,将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分),放入干净的离心管中,称取重量。

2. 向胶块中加入等体积溶胶液(如果凝胶重为0.1g,其体积可视为100µL,则加入100µL溶胶液),50℃水浴放置,期间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。如果还有未溶的胶块,可继续放置几分钟或再补加溶胶液直至胶块完全溶解。(若胶块的体积过大,可事先将胶块切成碎块)

注意:回收小于300bp的小DNA片段时,建议在加入溶胶液完全溶胶以后,再加入1/2胶块体积的异丙醇以提高DNA片段回收率;胶块完全溶解后,最好将胶溶液温度降至室温再上柱,因为吸附柱在较高温度时结合DNA的能力较弱。

3. 将上一步所得溶液加入一个吸附柱中(吸附柱放入收集管中),室温放置2min12000rpm离心30-60sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放入收集管中。

注意:吸附柱的容积为800µL,如果样品体积大于800µL可以分批加入。

4. 向吸附柱中加入600µL漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心30-60sec,弃废液,将吸附柱放入收集管中。

注意:如果回收的DNA片段是用于盐敏感的实验,例如平末端连接实验或直接测序,建议加入漂洗液后静置2-5min再离心。

5. 重复操作步骤4

6. 将吸附柱放入收集管中,12000rpm离心2min,尽量除尽漂洗液。将吸附柱置于室温放置数分钟,彻底晾干,防止残留的漂洗液影响后续实验。

7. 将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加适量洗脱液,室温放置2min12000rpm离心2min收集DNA溶液。

注意:

1)了增加回收效率,可将得到的洗脱液重新加入吸附柱中,室温放置2min12000rpm再次离心2min收集DNA溶液。

2)洗脱缓冲液体积应不少于30µL,体积过小影响回收效率。

3)洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响,若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5之间。

8. DNA产物-20℃保存。

注意事项(在使用本试剂盒前请阅读此注意事项):

1. 电泳前最好更换成新的电泳缓冲液,如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。

2. 如溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热适当时间,以溶解沉淀。

3. 本试剂盒为保证回收效率及纯度,建议琼脂糖凝胶电泳时上样体积不低于50µL;切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。

4. 当回收片段过小或过大、琼脂糖凝胶电泳上样体积低于50µL时,建议选择DP101B;回收小于100bp和大于10kbDNA片段时,应加大溶胶液的体积,延长吸附和洗脱的时间。

5. 回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。


产品参数

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