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实时荧光定量pcr仪的意义是什么?如何选择实时荧光定量pcr仪?

2022-08-06 16:27:55

实时荧光定量pcr仪的意义是什么?我们该如何选择实时荧光定量pcr仪?河北三狮生物科技有限公司为您介绍实时荧光定量pcr仪。

实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。

实时荧光定量PCR仪

实时荧光定量PCR 技术的主要应用:

1、DNA 或RNA 的**定量分析:包括病原微生物或病毒含量的检测,转基因动植物转基因拷贝数的检测,RNAi 基因失活率的检测等

2、基因表达差异分析:例如比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异(如药物处理、物理处理、化学处理等 ),特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA 芯片或差显结果的确证

3、基因分型:例如SNP 检测,甲基化检测等。

其中Realtime PCR 常用的两种方法分别为:Sybr green(荧光染料掺入法)

和Taqman probe (探针法)。

SYBR green法适用于:

1、灵敏度高:使用SYBR可使荧光效果增强到1000倍以上

2、通用性好,不需要设计探针,方法简便,省时,价格低廉。

3、通用型方法,在国内外科研中普遍使用。

4、高通量大规模的定量PCR检测

5、专一性要求不高的定量PCR检测。

Taqman Probe法适用于:

1、具有高适应性和可靠性,实验结果稳定重复性好,特异性更高。

2、适用于扩增序列专一的体系的检测。

3、样品中靶基因含量过低的定量PCR检测。

4、靶基因的特异序列较短,无论怎样优化引物设计条件都不能解决。

5、存在与靶基因同源的序列,在PCR中容易出现非特异性扩增,对特异性要求较高的定量。

6、广泛用于人类传染病的诊断和病原定量,在动物病原体基因的检测,畜禽产品的检验检疫,生物制品的鉴定。


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