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热启动Taq酶有什么优点

2022-07-13 16:23:48

热启动Taq酶是一种创新型的抗体修饰的热启动酶。该聚合酶经基因工程改造去除了5’→3’外切酶活性。该酶在室温下活性被完全封闭,避免了在样品准备及第 一循环反应升温阶段产生非特异性扩增和引物二聚体,增加了DNA扩增的特异性。加热到70℃时,结合在酶上的抗体迅速失活,且不会影响之后的Taq DNA聚合酶反应。

热启动Taq酶

使用抗体的热启动法,与化学修饰热启动法不同,无需长时间的变性步骤,具有在第 一循环的变性步骤中即可完全失活的优点,该酶具有特异性好、灵敏度高、重复性好、扩增效率高等优点。

特点:

来源于重组表达,分子量:90kD; 

无5’→3’和3’→5’外切酶活性。

失活或抑 制:

1.低浓度的尿素、甲酰胺、二甲基甲酰胺(DMF)和二甲基亚砜(DMSO)对Taq DNA聚合酶的活性无抑 制。

2.较高浓度的非离子表面活性剂如Tween-20、NP-40和Triton X-100(>5%)能抑 制Taq DNA聚合酶的活性。

3.极低浓度的离子表面活性剂如脱氧胆氨酸钠(<0.06%),十二烷基肌氨酸钠(<0.02%),十二烷基硫酸钠(SDS,<0.01%)几乎完全抑 制Taq DNA聚合酶活性。

4.酚/氯仿抽提可使Taq DNA聚合酶丧失活性。


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