抚顺市热启动Taq酶研发

Taq酶的酶动力与扩增效率有关。一般热启动Taq酶的酶动力越强，PCR扩增的指数增长期越长，‘S型’曲线更加典型，荧光信号值更高，而且更适合做多重PCR检测。我们曾比较过多家公司的热启动Taq酶，在国外品牌中，英国Bioline公司的热启动Taq酶，酶动力较好，可做4重PCR，等量起始模板CT30时的荧光信号值高。在国内品牌中，BIOG热启动Taq酶的指数期较长，可做3重PCR，且扩增曲线的‘S’型不受影响，其它的国产品牌一般只能支持2重反应，在做3重反应时，扩增曲线低矮，荧光信号值较低，无典型扩增曲线，结果很难判定。

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指导思想。按照保供固安 全、振兴畅循环的工作定位，立足维护养殖业发展安 全、公共卫生安 全和生物安 全大局，坚持防疫优先，扎实开展动物疫病强制免疫，切实筑牢动物防疫屏障。基本原则。坚持人病兽防、关口前移，预防为主、应免尽免，落实完善免疫效果评价制度，强化疫苗质量管理和使用效果跟踪监测，保证“真苗、真打、真有效".目标要求。强制免疫动物疫病的群体免疫密度应常年保持在百分之90以上，应免畜禽免疫密度应达到百分之100，高致病性禽流感、口蹄疫和小反刍兽疫免疫抗体合格率常年保持在百分之70以上。

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传染病流行过程的三:个基本环节:①传染源。即传染来源，就是被感染的动物，包括传染病病畜禽和带菌(毒)动物，如潜伏期带菌(毒)、病愈后带菌(毒)及健康动物带菌(毒)等。②传播方式和途径。有直接接触传播及间接接触传播。③易感动物。就是对某种传染病的病原体有易感性的动物。

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动物检疫的分类:根据我国现行的动物检疫法律规定，我国动物检疫分为进出境检疫和国内.检疫两大类。①进出境动物检疫。是指对进出我国国境的动物、动物产品，由口岸动植物检疫机关实施的检疫。具体分为:进境动物、动物产品检疫;出境动物、动物产品检疫;过境动物、动物产品检疫;②国内检疫。指对国内流动的动物、动物产品所进行的检疫。具体划分为:产地检疫、屠宰检疫、动物产品检疫。

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热启动PCR（hot start PCR）是指使Taq DNA 聚合酶只有在样品温度至少超过70℃时才发挥作用的PCR，可提高反应的特异性。Taq DNA 聚合酶通常在比适宜温度低得多的条件下仍有较强的活性。PCR 反应的初加热过程中，样品温度上升到70℃之前，在较低的温度下引物可能与部分单链模板形成非特异性结合，并在Taq DNA 聚合酶的作用下延伸。结果会导致非靶序列的扩增，影响反应的特异性。热启动可减少非靶序列的扩增，提高反应的特异性。在引物设计时如果某位点因为遗传元件的定位而受限，如site-directed 突变、表达克隆或用于DNA 工程的遗传元件的构建和操作等情况，热启动PCR 尤为有效。