齐齐哈尔市实时荧光定量PCR仪应用

化验室诊断方法- -般采用的检测依据为国家标准、农业标准，其次是有关动物疫病检测的其它技术规程、规范等，还可以采用化验室自行设定的检测方法。应结合化验室条件及样品类型等因素来选择合适的方法。例如，化验室需诊断伪狂犬病，如果没有基因扩增仪，但有酶标仪，就可以采用酶联免疫吸附试验诊断，而不必用聚合酶链反应试验诊断。使用化验室自行设定的检验方法要慎重,因为，一该检验方法是否正确有待验证;二如果将来有争议.上诉法院，会有较大的麻烦。

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常规普通PCR常见问题：1. 优化反应条件，梯度摸索退火温度，延长退火延伸时间，增加反应循环数（30-45区间为宜）。2. 对核酸模板进行纯化，或使用商业化核酸提取试剂盒进行提取，增加核酸模板的上样量。3. 优化反应体系（预混体系除外），改变检测体系中的Mg2+浓度及dNTPs用量，更换体系中Buffer。4. 重新设计引物，避免引物二聚体和链内二级结构，在一次稀释引物后可分装成多支小管，减少反复冻融次数。

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实时荧光定量pcr仪，由荧光定量系统和计算机组成，用来监测循环过程的荧光。与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。实时设备的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的差异。正常化后可以设定域值水平，这就是分析荧光数据的水平。

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传染病流行过程的三:个基本环节:①传染源。即传染来源，就是被感染的动物，包括传染病病畜禽和带菌(毒)动物，如潜伏期带菌(毒)、病愈后带菌(毒)及健康动物带菌(毒)等。②传播方式和途径。有直接接触传播及间接接触传播。③易感动物。就是对某种传染病的病原体有易感性的动物。

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世界各国高度重视分子诊断技术的发展，基因芯片将成为新一代分子诊断试剂开发的主流。基因芯片是分子生物学、微电子、计算机等多学科结合的结晶，综合了多种现代高精尖技术，被专家誉为“诊断行业产品”。基因芯片具有同时能够检测多个靶点的功能，具有快速有效的特点。因而基因芯片成为新一代分子诊断试剂的主要开发方向，但其成本高、开发难度大，产品种类很少，只用于科研和药物筛选等用途。基因芯片的大规模临床应用还存在尚未克服的技术缺陷，主要是由于芯片诊断特异性和灵敏度低、芯片诊断成本高昂和芯片诊断配套仪器价格昂贵等原因。